Skip to content

Ekspresja receptora leukotrienowego na komórkach zapalnych błony śluzowej nosa w zapaleniu nosa i nosów wrażliwym na aspirynę czesc 4

1 miesiąc ago

464 words

Pacjenci zostali losowo przydzieleni w podwójnie ślepej próbie, aby otrzymać 8 mg aspiryny lizyny lub pasujących do placebo, aplikowanych zewnętrznie do obu nozdrzy co drugi dzień. Przypisanie do aktywnej terapii lub placebo zostało ustalone z listą liczb losowych w protokole administrowanym przez członków personelu apteki szpitalnej. W dwutygodniowej próbie pięciu pacjentów otrzymywało aspirynę lizynową, a czterech otrzymywało placebo. W sześciomiesięcznym badaniu pięciu pacjentów otrzymało aspirynę lizynową, a czterech otrzymało placebo. Zgodność zweryfikowano badając, w przypadkowych odstępach czasu, objętość roztworu pozostającego w dostarczonych butelkach zawierających aspirynę lizyny lub placebo. Biopsje nosowe, przetwarzanie próbek i analiza immunohistochemiczna
Biopsje nosowe i przetwarzanie kodowanych próbek przeprowadzono w sposób opisany uprzednio .9,13,25 Poliklonalne przeciwciała królika selektywne i swoiste wobec receptora CysLT1 lub receptora LTB4 (Cayman Chemicals) i szeroko zwalidowane przez innych26 stosowano do analizy immunohistochemicznej. Immunoznaczanie za pomocą kompleksu awidyna-biotyna przeprowadzono w sposób opisany uprzednio. 9,13 W skrócie, pierwotne przeciwciała specyficzne dla receptora CysLT1 i receptora LTB4 zastosowano w rozcieńczeniach odpowiednio 1:50 i 1: 600. Pierwszorzędowe przeciwciała wykrywano za pomocą świńskiego biotynylowanego drugorzędowego przeciwciała przeciwpłytkowego (Dako) (stosowanego w rozcieńczeniu 1: 200) i następującego po nim zastosowania roztworu awidyny-biotyny (Dako). Brązową reakcję immunoperoksydazy opracowano za pomocą diaminobenzydyny (Sigma).
W celu wykrycia komórek wykazujących ekspresję CD45.9,13 zastosowano immunobarwienie kompleksem avidin-biotyna. W skrócie, skrawki barwiono mysim przeciwciałem monoklonalnym anty-ludzkim CD45 (Dako) w rozcieńczeniu 1: 100. Pierwotne przeciwciała zostały następnie wykryte za pomocą skoniugowanego z biotyną, drugiego poziomu króliczego przeciwciała antymaterii (Dako) w rozcieńczeniu 1: 400 i późniejszym zastosowaniu kompleksu awidyna-biotyna (Dako). Brązową reakcję wywołano za pomocą diaminobenzydyny.
Podwójne barwienie immunologiczne komórek eksprymujących receptor CysLT1 i receptor LTB4 oraz markery leukocytów-fenotyp przeprowadzono w sposób opisany uprzednio. 9,13 Krótko mówiąc, mysie przeciwciała monoklonalne UCHT1 (anty-CD3, Dako, rozcieńczenie 1:50), PGM1 (przeciw -CD68, Dako, rozcieńczenie 1: 100), EG2 (białko kationowe antyemiozynofilów, Pharmacia, rozcieńczenie 1: 100), AA1 (tryptaza przeciw mastocytom, Dako, rozcieńczenie 1:50) i NP57 (elastaza przeciwnowotworowa, Dako; : Rozcieńczenie 100) do identyfikacji komórek T, makrofagów, aktywowanych eozynofilów, komórek tucznych i neutrofili, odpowiednio. Do wykrycia tych przeciwciał zastosowano przeciwciało drugorzędowe z kozim antymouse skoniugowanym z fosfatazą alkaliczną (Seralab, rozcieńczenie 1: 100). Powstała niebieska reakcja z tetrazolem 5-bromo-4-chloro-3-indolilu (nitrobiolem) (Sigma). Królicze przeciwciała poliklonalne wykrywano w sposób opisany powyżej. Podwójnie wybarwione komórki zidentyfikowano przez ekspresję zarówno niebieskiego, jak i brązowego osadu.
Komórki w kodowanych odcinkach biopsji zostały policzone przez badacza bez wcześniejszej znajomości protokołu. Pozytywne komórki zliczano za pomocą mikroskopu (Olympus) podłączonego do analizatora obrazu i związanego z nim oprogramowania (KSS 300, Zeiss)
[patrz też: dyżury aptek brzeg, endometrioza co to jest, korony teleskopowe ]
[więcej w: endometrium 8mm, grudziądz jednostka wojskowa, korony teleskopowe ]

0 thoughts on “Ekspresja receptora leukotrienowego na komórkach zapalnych błony śluzowej nosa w zapaleniu nosa i nosów wrażliwym na aspirynę czesc 4”